ก่อนอื่นเลยเรามารู้จักคำว่า การcloningกันก่อน
ซึ่งหมายถึงว่า การสร้างสิ่งที่มีลักษณะทางพันธุกรรมออกมา เหมือนกับสิ่งมีชีวิตที่มีอยู่ก่อน หรือเหมือนกับสิ่งมีชีวิตต้นแบบนั่นเอง
ซึ่งการ ที่จะทำการcloning นั้นจะต้องมีการใช้หลักการทางพันธุวิศวกรรมเข้ามา
โดยส่วนใหญ่แล้วเมื่อเราพูดถึงการcloning เราจะนึกถึงการcloningจีน
หรือเรียกว่า Gene cloning นั่นเอง
Gene cloning เป็นการเพิ่มปริมาณยีนที่เราต้องการ(target gene)ให้มีปริมาณมาก
โดย target gene ได้มาจากการตัดชิ้นส่วนจีนของสิ่งมีชีวิตที่เราต้องการศึกษา
โดยใช้ Restriction enzyme ซึ่งเป็น enzymeที่ตัดสายดีเอ็นเอในบริเวณลำดับเบสที่มีความจำเพาะ
บริเวณลำดับเบสที่ตัดนั้นเรียกว่า Recognition site
หลังจากที่เราได้ชิ้นส่วน target gene นี้ออกมาแล้ว ก็จะนำไปเชื่อมต่อ(ligate)กับ ดีเอ็นเออื่นที่ตัดด้วยRestriction enzyme ตัวเดียวกัน โดยดีเอ็นเอนี้ เรียกว่า vector หรือ ดีเอ็นเอพาหะ
ภาพจาก: http://www.abfrontier.com/cs/gene.do
เราก็จะนำ target gene มาต่อกับ vector โดยใช้ enzymeที่ชื่อว่า DNA ligase
เมื่อเชื่อมต่อกันแล้วจะได้DNAสายผสม เรียกว่า recombinant DNA
จากนั้นเราก็จะนำ recombinant DNAนี้ เราก็จะนำใส่เข้าไปในเซลล์ที่เราต้องการให้เพิ่มปริมาณ DNAที่เราต้องการ เรียกเซลล์นั้นว่า recipient cell หรือ เซลล์ผู้รับ แล้วนำไปเพาะเลี้ยงให้ได้ปริมาณมากๆ
และทำการศึกษาต่อไป
สรุป การทำgene cloning จะทำให้เราเพิ่มปริมาณสารพันธุกรรมที่เราต้องการ ไม่ว่าจะเป็น DNA หรือ RNA โดยมีประโยชน์ในด้านต่างๆ เช่น ศึกษาการแสดงออกของโปรตีน ศึกษาลำดับเบส ศึกษาการmutation เป็นต้น
